Resumen Introducción. Las especies fúngicas del género Pochonia son importantes para el manejo de nematodos fitoparásitos. Algunas de ellas colonizan en forma endófita a sus hospedantes vegetales y les proporcionan adaptabilidad, bio-estimulación vegetal e inducción de resistencia; dichas ventajas son esenciales para la selección de cepas a utilizar en el bio-manejo de fitonematodos. Objetivo. Evaluar la colonización endofítica y la bio-estimulación vegetal por las cepas nematófagas IMI SD 187 y 193 de P. chlamydosporia sobre especies hortícolas de las familias Solanaeceae y Cucurbitaceae. Materiales y métodos. El experimento se realizó dentro de invernaderos en el Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, provincia Mayabeque, Cuba. Se utilizaron dos cepas de P. chlamydosporia, denominadas IMI SD 187 y 193, así como tomate (S. lycopersicum) cv. HA 3057, pimiento (Capsicum annuum L.) cv. Grandísimo, pepino (Cucumis sativus L.) cv. INIVIT P 2007 y melón (Cucumis melo L.) cv. Zest F1. En ambas cepas se evaluó la colonización endofítica, del sustrato y de la raíz, así como algunos parámetros del crecimiento de las plantas. Resultados. Las cepas evaluadas colonizaron entre 3 y 16 % el interior de las raíces. La cepa IMI SD 187 colonizó a todas las especies evaluadas, mientras que 193 no pudo colonizar al melón; sin embargo, ambas cepas colonizaron la raíz y el sustrato con valores entre 2x103 y 2x104 UFC g-1, respectivamente. IMI SD 187 alcanzó los mayores valores de bio-estimulación en longitud y masa fresca de las raíces en pimiento. Conclusión. Las dos cepas autóctonas de P. chamydosporia colonizaron a las especies estudiadas y la mayor bio-estimulación del crecimiento se obtuvo con IMI SD 187 en el cultivar de pimiento.

Abstract Introduction. The fungal species of the genus Pochonia are important for the management of phytoparasitic nematodes. Some of them endophyte colonize their plant hosts and provide adaptability, plant bio-stimulation, and resistance induction; these advantages are essential for the selection of strains to be used in the bio-management of phytonematodes. Objective. To evaluate the endophytic colonization and plant bio-stimulation by the nematophagous strains IMI SD 187 and 193 of P. chlamydosporia on horticultural species of the Solanaeceae and Cucurbitaceae families. Materials and methods. The experiment was carried out inside greenhouses at the National Center for Animal and Plant Health, Mayabeque province, Cuba. Two strains of P. chlamydosporia were used, named IMI SD 187 and 193, as well as cultivars of tomato (S. lycopersicum) cv. HA 3057, pepper (Capsicum annuum L.) cv. Grandisimo, cucumber (Cucumis sativus L.) cv. INIVIT P 2007, and melon (Cucumis melo L.) cv. Zest F1. In both strains, endophytic, substrate, and root colonization, as well as some plant growth parameters were evaluated. Results. The evaluated strains colonized between 3 and 16 % of the interior of the roots. The IMI SD 187 strain colonized all the evaluated species, while 193 could not colonize the melon; however, both strains colonized the root and the substrate with values between 2x103 and 2x104 CFU g-1, respectively. IMI SD 187 reached the highest bio-stimulation values in length and fresh mass of the roots in pepper. Conclusion. The two native strains of P. chlamydosporia colonized the studied species and the highest bio-stimulation of growth was obtained with IMI SD 187 in the pepper cultivar.

Summary: The edaphic conditions present in agroecosystems can influence the establishment and effectiveness of a microbial control agent for nematodes. For this reason, the objective of the present investigation was proposed to evaluate the in vitro establishment of Pochonia chlamydosporia var. catenulata in Cuban agricultural soils of the Ferralitic, Fluvisol and Brown type. For this, three types of soils were analyzed using the soil membrane technique, evaluating in each one of them the native microbial populations, the mycelial growth and the relative growth of the nematopophagous fungus of interest. A completely randomized design was used and the statistical processing of the data obtained was performed using a factorial ANOVA and linear regression. The results showed that P. chlamydosporia var. catenulata grew and produced chlamydospores in all the edaphic conditions evaluated, however, the greatest growth was registered in Fluvisol and Ferralitic soils compared to Pardo. This suggested that the higher native microbial populations and the acid pH present in the Brown soil, could affect the growth of this fungus. The results obtained confirm that the nematophagous fungal species P. chlamydosporia var. catenulata has adaptability, persistence and multiplication capacity in different soils and its use is suggested in Fluvisol, Ferralitic and Brown soils, provided they do not present an acid pH ≤ 4.17.

Resumen: Las condiciones edáficas presentes en los agroecosistemas pueden influir en el establecimiento y la efectividad de un agente de control microbiano para nematodos. Por esta razón, se propuso como objetivo de la presente investigación, evaluar el establecimiento in vitro de Pochonia chlamydosporia var. catenulata en suelos agrícolas cubanos de tipo Ferralítico, Fluvisol y Pardo. Para ello, tres tipos de suelos se analizaron mediante la técnica suelo membrana, evaluándose en cada uno de ellos las poblaciones microbianas nativas, el crecimiento micelial y el crecimiento relativo del hongo nematófago de interés. Se utilizó un diseño completamente aleatorizado y el procesamiento estadístico de los datos se realizó mediante un ANOVA factorial y regresión lineal. Los resultados demostraron que, P. chlamydosporia var. catenulata creció y produjo clamidosporas en todas las condiciones edáficas evaluadas, no obstante, el mayor crecimiento se registró en los suelos Fluvisol y Ferralítico comparado con el Pardo. Lo cual sugirió, que las mayores poblaciones microbianas nativas y el pH ácido presente en el suelo Pardo, pudieron afectar el crecimiento de este hongo. Los resultados confirman que la especie fúngica nematófaga P. chlamydosporia var. catenulata posee capacidad de adaptación, persistencia y multiplicación en diferentes suelos y se sugiere su utilización en los suelos Fluvisol, Ferralítico y Pardo, siempre que no presenten un pH ácido ≤ 4.17.

ABSTRACT The aim of this work was to evaluate the effect of the strain IMI SD 187 of P. chlamydosporia var. catenulata as an endophyte on plant growth promotion of the black bean cv. ´Cuba Cueto 25-9´ (CC 25-9 N). Two experiments were carried out, in vitro and under greenhouse conditions. In vitro, the bean seeds were coated with a mixture of the fungal spores and clay at different doses: 1, 5, 10 and 15% respect to the total weight of the seeds. A negative control with only disinfected seeds and a positive control of seeds coated with the clay (15 %) were used. The germination associated parameters in each treatment were compared. In the greenhouse experiment, the application of the fungus was evaluated by coating the seeds, applying a fungal suspension to the substrate, or by combining them, taking into account the rhizosphere colonization by the strain and the plant growth on the soil: organic fertilizer (3:1 v/v) substrate. The strain IMI SD 187 increased the in vitro germination parameters of the bean seeds, with a significant effect on hypocotyl length and fresh plant weight. High root colonization was achieved with two applications of the fungus, the endophytic root colonization was 16,67 % in 30 days and seed germination was advanced in two days. There was a tendency to increase the parameters number of trifoliate leaves, shoot length, fresh and dry plant weight, and fresh root weight, in different treatments with the fungus compared with the control treatment.

RESUMEN El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la cepa IMI SD 187 de P. chlamydosporia var. catenulata como endófito en la promoción del crecimiento de plantas de frijol negro cultivar ´Cuba Cueto 25-9´ (CC 25-9N). Se realizaron dos experimentos, uno en condiciones in vitro y otro en casa de vegetación. In vitro, se aplicó una mezcla de esporas del hongo y arcilla mediante recubrimiento de las semillas en diferentes dosis: 1, 5, 10 y 15 % respecto al peso total de las semillas. Las semillas desinfectadas sin recubrir fueron el control negativo y el control positivo las semillas recubiertas con arcilla (15 %). Se compararon los parámetros asociados a la germinación en cada tratamiento. En casa de vegetación se evaluó la aplicación del hongo mediante recubrimiento de semillas o al sustrato en suspensión y la combinación, teniendo en cuenta la colonización de la cepa en la rizosfera y el crecimiento vegetal sobre sustrato suelo: abono orgánico (3:1 v/v). La cepa incrementó los parámetros asociados a la germinación in vitro de semillas de frijol, con un efecto significativo en la longitud del hipocotilo y la masa fresca de las plántulas. Con dos aplicaciones se logró una elevada colonización en la raíz, con un crecimiento endofítico de 16,67 % en 30 días y adelantó la germinación en dos días. Se observó una tendencia a incrementar los parámetros número de hojas trifoliadas, longitud del tallo, masa fresca y seca aérea, y masa fresca de raíz, en diferentes tratamientos con el hongo respecto al control.

The experiment was aimed at determining the effect of 50 mmol.L-1 of NaCl on the interaction between the strain IMI SD 187 of Pochonia chlamydosporia var. catenulata Kamyschko ex Barron y Onions) Zare and Gams and Meloidogyne incognita (Kofoid y White) in tomato plant. For it, a completely randomized design with seven treatments and one control and with five replicas was set up at the National Center for Plant and Animal Health (CENSA, Cuba). The treatments consisted of the separated action of the fungus and the nematode and their interaction in tomato in the presence of NaCl. After 65 days, gall index, number of M. incognita second stage juveniles in the soil, and the saprophytic and parasitic activity of the strain IMI SD 187 were evaluated, and the potentiometric pH and soil electrical conductivity were recorded. One-way ANOVA was used and the treatment means were compared with Tukey test (p≤0.05), processed with STATISTICA v. 8 software. The results showed that the strain IMI SD 187 colonized the root in a range of 1.9-4.2x10³ CFU, reached a population record in the soil of 1.5-3.3x10(4) CFU, parasitized 63% of the nematode eggs, and colonized 80% of the egg masses in the presence of NaCl

La investigación tuvo como propósito determinar el efecto de una concentración de 50 mmol.L-1 de NaCl sobre la interacción entre la cepa IMI SD 187 de Pochonia chlamydosporia var. catenulata Kamyschko ex Barron y Onions) Zare y Gams y Meloidogyne incognita (Kofoid y White) en el cultivo de tomate. Para ello, se estableció un experimento en el Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA), Cuba, con siete tratamientos y un control; estos se conformaron mediante la acción aislada y la interacción hongo-nematodo en presencia de NaCl y utilizando el tomate como hospedante. Luego de 65 días se evaluaron el índice de agallamiento, la cantidad de juveniles de segundo estadio de M. incognita en el suelo, la actividad saprofítica y parasítica de la cepa IMI SD 187, se registró el pH potenciométrico y la conductividad eléctrica del suelo. Se usó un diseño completamente aleatorizado con cinco réplicas por cada tratamiento. El procesamiento estadístico se efectuó mediante un ANOVA unifactorial y las medias se compararon con la prueba de comparación múltiple de medias de Tukey (p≤0,05), procesado con el paquete STATISTICA v. 8. Los resultados demostraron que la cepa IMI SD 187 colonizó la raíz en un rango de 1,9-4,2x10³ UFC, registró una población en el suelo de 1,5-3,3x10(4) UFC, parasitó 63% de huevos y colonizó 80% de masas de huevos de M. incognita en presencia de la concentración de NaCl utilizada

Endophytic fungi protect and benefit the plants in a natural way. The objective of this paper was to determine the entophytic activity of the fungus Pochonia chlamydosporia var. catenulata (Goddard) Zare and Gams var. catenulata strain IMI SD 187 (KlamiC®) and its effect on plant growth promotion of banana and plantain vitroplants. The ‘CEMSA ¾’ (AAB), ‘Pisang Ceilan’ (AAB), ‘FHIA-01’ (AAAB) and ‘FHIA-18’ (AAAB) cultivars were used. The vitroplants were transplanted to polypropylene trays and black polyethylene bags with bovine compost substrate, and they were then randomly distributed in the acclimatization area. Two applications were made with KlamiC® (5,6 x 10(5) clamidospores.vitroplanta-1) The variables evaluated were the vegetative growth and the substrate and root colonization by the fungus, using a completely randomized experimental design with 70 repetitions per treatment with KlamiC® and the absolute control without KlamiC® for each cultivar. The data were analyzed by a simple analysis of variance followed by Fisher’s LSD test. A significant increase of growth was produced in the plants treated with KlamiC® compared with the controls. Substrate and plant rhizosphere was colonized by the fungus, with a lower percentage in the cultivar ‘FHIA-18’ (AAAB) con 4,15 %

Los hongos endófitos protegen y benefician las plantas de forma natural. El estudio tuvo como objetivo, determinar la actividad endofítica de Pochonia chlamydosporia var. catenulata (Goddard) Zare y Gams cepa IMI SD 187 (KlamiC®) y su efecto en la promoción del crecimiento de vitroplantas de plátanos y bananos. Se utilizaron los cultivares ‘CEMSA ¾’ (AAB), ‘Pisang Ceilan’ (AAB), ‘FHIA-01’ (AAAB) y ‘FHIA-18’ (AAAB). Se trasplantaron a bandejas de polipropileno y bolsas de polietileno negro, con sustrato de estiércol vacuno y posteriormente se distribuyeron aleatoriamente en el área de aclimatización. Se efectuaron dos aplicaciones de KlamiC® (5,6 x 10(5) clamidosporas.vitroplanta-1). Como variables se evaluaron el crecimiento vegetativo y la colonización del hongo en el sustrato y raíces, utilizando un diseño experimental completamente al azar, con 70 repeticiones por tratamiento con KlamiC® y el control absoluto sin KlamiC®, por cada cultivar. Los datos se analizaron mediante análisis de varianza simple, seguido de la prueba de comparación múltiple LSD de Fisher. Se produjo un incremento significativo del crecimiento de las vitroplantas tratadas con KlamiC®, en comparación con los controles. El hongo colonizó el sustrato y la rizosfera de las vitroplantas, con menor porcentaje en el cultivar ‘FHIA-18’ (AAAB) con 4,15 %

The objective of this research work was to evaluate the effect of applying different doses of mineral fertilization, organic fertilization (worm humus) or arbuscular mycorrhizal fungi (Glomus hoi-like) separately or in combination on the establishment of the strain IMI SD 187 of P. chlamydosporia var. catenulata. The experiment was carried out using the tomato (Solanum lycopersicum L.) hybrid HA-3108 in a greenhouse at «Los 3 Picos» farm in Havana, Cuba. Colonization of the soil and roots by the selected strain was assessed in each treatment. The number of P. chlamydosporia colony forming units in soil and roots was directly related to the application of arbuscular micorrhizal fungi and worm humus according to the Principal Component analysis and the biplot graph used. A direct relationship between the mineral fertilization and P. chlamydosporia colonization of roots was found, while it was inverse respect the soil colonization. These results indicated that the nutritional treatments favored P. chlamydosporia (IMI SD 187) growth, with more significant effects when the arbuscular mycorrhizal fungi were used combined with the worm humus.

El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de diferentes dosis de fertilización mineral, fertilización orgánica con humus de lombriz y hongos micorrízicos arbusculares (Glomus hoi-like), aplicados de manera separada o en combinación, sobre el establecimiento de la cepa IMI SD 187 de Pochonia chlamydosporia var. catenulata. El experimento se realizó en cultivo protegido en la Granja «Los 3 Picos», La Habana, Cuba. Se utilizó tomate (Solanum lycopersicum L.), híbrido HA-3108, y se evaluó la colonización de la cepa seleccionada en el suelo y las raíces para cada tratamiento. El análisis de componentes principales, unido al gráfico de biplot, mostró una relación directa entre la utilización de micorriza y humus con el número de colonias de P. chlamydosporia en el suelo y la raíz. La fertilización mineral tuvo una relación directa con el número de colonias en la raíz e inversa con la colonización de este hongo en el suelo. Estos resultados indicaron que los tratamientos nutricionales probados favorecieron el crecimiento P. chlamydosporia (IMI SD 187) y el efecto combinado de micorriza y humus resultó ser el más significativo.

The objective of this work was to evaluate the effectiveness of two methods for monitoring Mahanarva andigena Jacobi from the biological and economic point of view under the conditions of Pastaza Province. Four representative communities of the province were selected for their higher surface in production of sugarcane (Saccharum spp.) variety POJ 93 (Limeña). A crop hectare was selected in each of three farms randomly selected in each of the communities. M. andigena populations were monitored by using two methods, direct counting of insects and yellow sticky traps, from December 2012 to August 2013, with intervals of ten days. The density of adults obtained by the direct counting showed a progressive increment from February with a maximum value above the economic threshold in March and April, and then it tended to decrease until the last assessment. The method yellow sticky traps showed a high variation among the several assessments and the economic threshold was never reached during the period studied. From the biological point of view, the direct counting of M. andigena populations was the most appropriate method since it provided reliable information, recorded the population data of the nymphal and adult (male and female) insect pest stages, and additionally, it was the most economic.

El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar la eficacia de dos métodos de monitoreo de Mahanarva andigena Jacobi, desde el punto de vista biológico y económico. El estudio se desarrolló en las condiciones de la provincia Pastaza, Ecuador, donde se seleccionaron cuatro parroquias representativas de la provincia, debido a su mayor superficie en producción de caña de azúcar (Saccharum spp.), variedad POJ 93 (Limeña). Para el estudio, que se desarrolló desde diciembre de 2012 hasta agosto de 2013, se eligieron tres fincas al azar en las parroquias y en cada una se seleccionó una hectárea para el estudio. En el monitoreo de las poblaciones de M. andigena se utilizaron dos métodos: conteo directo de individuos y trampas adhesivas amarillas; las evaluaciones se hicieron con intervalos de diez días. La densidad de adultos, que se obtuvo mediante el conteo directo, mostró incremento progresivo a partir de febrero y alcanzó el valor máximo en los meses de marzo y abril, pues superó el umbral de daño económico y, posteriormente, tendió a disminuir hasta la última evaluación. El método de trampas adhesivas amarillas presentó alta variación entre monitoreos y no alcanzó el umbral de daño económico durante el periodo en estudio. Desde el punto de vista biológico, el método de conteo directo de poblaciones de M. andigena resultó ser el más adecuado, porque permite obtener información confiable, contabiliza los datos poblacionales de las fases de ninfa y adultos (machos y hembras) del insecto plaga y, además, fue el más económico.

Las sales presentes en aguas y suelos agrícolas, pueden conferirle efectos desfavorables a los agentes microbianos utilizados para el control de plagas presentes en el agroecosistema. Por esta razón, se propuso determinar los efectos de las concentraciones de NaCl sobre el desarrollo micelial y la esporulación de P. chlamydosporia en medio PDA y suelo. Para ello, se realizaron dos ensayos por separado y los tratamientos consistieron en cuatro concentraciones de NaCl (40, 80, 120 y 160 mmol.L-1) y un control. Se determinó la inhibición del crecimiento micelial y la esporulación, las mismas se analizaron mediante ANOVA unifactorial y se compararon con la prueba de Duncan. En el primer ensayo, la menor inhibición se obtuvo a la concentración de 40 mmol.L-1 de NaCl, la cual afectó el área de la colonia en 6,55%, la esporulación en 21,57% y el tratamiento de 160 mmol.L-1 causó las mayores afectaciones con valores de 51,35% y 85,17%, respectivamente. En el segundo ensayo, la menor inhibición del área de la colonia 11,59% se alcanzó con la concentración de 40 mmol.L-1 y la mayor 33,50% se constató a 160 mmol.L-1. En todas las concentraciones de NaCl evaluadas P. chlamydosporia produjo clamidosporas sobre el suelo Fluvisol. Los resultados obtenidos señalaron las potencialidades que posee este hongo de persistir y proliferar bajo los efectos de altas concentraciones de NaCl en medio PDA y suelo, convirtiéndolo en un candidato promisorio para el biomanejo de Meloidogyne spp., en agroecosistemas con problemas de salinidad.

Eight formulations elaborated according to combinations of the pure powder of the nematophagous fungus Pochonia chlamydosporia var. catenulata IMI SD 187, zeolite as additive at 50%, 80% or 90%, sealing in absence or presence of atmospheric air, and storage at 4°C or 25°C, for 16 treatments were evaluated. For each treatment, the percentage of humidity and the concentration of viable fungi (UFC.g-1) were measured; for stability identification, Friedman's non-parametric test was used comparing four evaluation times (beginning, 15, 30 and 45 days). By means of the principal component analysis, the main factors influencing chlamydospore germination were identified. Finally, using the response surface methodology, a maximum of germination percentage was identified. In all the treatments, the humidity percentage remained below 10%, but the concentration of viable fungi was stable only in six treatments. Results were not significantly modified by the presence of air in the packages. A point of maximum chlamydospore germination was reached using 30 to 40% of zeolite and the storage at 15°C. A compound central design 10+2x2+2 was recommend to validate the process.

Se evaluaron 8 formulaciones elaboradas según combinación de polvo puro del hongo nematófago Pochonia chlamydosporia var. catenulata IMI SD 187, uso de zeolita como relleno (50%, 80%, 90%) y sellaje (ausencia o presencia de aire atmosférico), y se modificaron las condiciones de almacenamiento (4°C ó 25°C), para un total de 16 tratamientos. Para cada tratamiento, se midió el porcentaje de humedad y la concentración de hongo viable (UFC.g-1). Para identificar estabilidad se empleó la prueba no paramétrica de Friedman comparando cuatro momentos de evaluación (inicio, 15, 30 y 45 días). Mediante un análisis de componentes principales se identificaron los factores de mayor incidencia en la germinación de clamidosporas. Finalmente, por medio de la metodología de superficie respuesta se obtuvo la combinación de porcentaje de relleno de zeolita y temperatura de almacenamiento que favoreció la germinación. En todos los tratamientos el porcentaje de humedad permaneció por debajo del 10%, pero en solo 6 tratamientos la concentración de hongo viable se mantuvo estable. El oxígeno y nitrógeno del aire no modificaron significativamente los resultados. Se localizó un punto de máxima germinación de clamidosporas con el empleó de 30 a 40% de zeolita como relleno, almacenando el producto a 15°C. Se propuso un diseño compuesto central 10+2x2+2 para validar el proceso.

O nematóide das galhas, Meloidogyne mayaguensis, causa sérias perdas econômicas em plantações de goiaba no Brasil. Fungos parasitas de ovos de M. mayaguensis ainda não foram estudados no Brasil, mas essas informações podem servir de base para estudos futuros de controle biológico em campo. Os fungos parasitas de ovos, Pochonia chlamydosporia var. chlamydosporia, P.chlamydosporia var. catenulata e Lecanicillium psalliotae foram isolados em ovos de M. mayaguensis e analisados quanto às suas características morfológicas e culturais. Para os isolados de P. chlamydosporia a melhor temperatura para crescimento e esporulação variou entre 24 e 28 ºC. Para o isolado de L. psalliotae, a melhor temperatura para crescimento foi 30 ºC. Em estado sólido, os isolados de P. chlamydosporia produziram entre 3,5 e 5,2 x 10(6) chlamidosporos por g de substrato colonizado, enquanto que o isolado de L. psalliotae produziu 8,5 x 10(8) conídios por g de substrato colonizado. Há necessidade de estudos futuros para mostrar o potencial desses fungos como agentes de controle biológico de M. mayaguensis.

The root-knot nematode, Meloidogyne mayaguensis, causes serious economic loss to guava plantation in Brazil. Fungi associated with eggs of M. mayaguensis in Brazilian soil have not been studied yet, but this knowledge could form the basis for future field studies on biological control of this nematode. The egg parasitic fungi, Pochonia chlamydosporia var. chlamydosporia, P.chlamydosporia var. catenulata and Lecanicillium psalliotae, were isolated from M. mayaguensis eggs and analyzed based on their cultural and morphological characteristics. The optimum temperature for growth and spore production ranged between 24 and 28ºC for P. chlamydosporia isolates. For the isolate of L. psalliotae, the best growth was at 30ºC. In solid state fermentation, P. chlamydosporia isolates produced between 3.5 and 5.2 x 10(6) chlamydospores per g of colonized substrate, whereas L. psalliotae isolate produced 8.5 x 10(8) conidia per g of colonized substrate. Future studies are required to clarify the potential of these fungi as biological control agents of M. mayaguensis.